迄今為止，與傳統(tǒng)的抗癌治療策略相比，免疫治療被認(rèn)為是最有前景的全身性腫瘤治療方法，在提高治療效果方面發(fā)揮著不可或缺的作用。新興的癌癥免疫療法包括癌癥疫苗、CAR－T細(xì)胞治療、細(xì)胞因子治療、免疫檢查點(diǎn)抑制劑和腫瘤靶向單克隆抗體。其中，單克隆抗體因其特異性靶向分子的能力，已成為癌癥治療中一種關(guān)鍵和有效的治療方式。然而，由于腫瘤復(fù)雜的疾病發(fā)病機(jī)制，針對(duì)單一靶點(diǎn)的單克隆抗體往往不足以表現(xiàn)出足夠的治療效果。因此，針對(duì)多個(gè)靶點(diǎn)的雙特異性抗體（bsAbs）應(yīng)運(yùn)而生，它的發(fā)展改變了腫瘤免疫治療的領(lǐng)域。

CD47 是一種具有糖基化的跨膜蛋白，在多種惡性腫瘤中表達(dá)普遍上調(diào)。CD47／SIRPα軸被認(rèn)為是腫瘤免疫學(xué)中一個(gè)新靶點(diǎn)，而CD47在腫瘤發(fā)生中起主要作用，因?yàn)槠湓诎┘?xì)胞中的增強(qiáng)表達(dá)可以避免吞噬作用。目前，一些針對(duì)CD47的免疫療法，包括單克隆抗體、CAR－T細(xì)胞、ADC都已進(jìn)入臨床研究階段，這里我們主要總結(jié)了一些針對(duì)CD47的bsAb，以及它們的可能機(jī)制、安全性和療效。

CD47的結(jié)構(gòu)和功能

CD47的分子量為45－55kDa，屬于免疫球蛋白超家族，是由整合素、G蛋白和膽固醇組成的超分子復(fù)合物。CD47的結(jié)構(gòu)包括與相應(yīng)配體相互作用的胞外可變區(qū)、高疏水性跨膜段形成的跨膜區(qū)和親水羧基端胞內(nèi)區(qū)，CD47 激活后可以介導(dǎo)細(xì)胞增殖、遷移、吞噬以及細(xì)胞凋亡，免疫穩(wěn)態(tài)和抑制NO信號(hào)傳導(dǎo)等一系列過(guò)程。CD47的配體包括SIRPα、血小板反應(yīng)蛋白－1（TSP－1）和整合素（αvβ3 和α2β1）。

癌細(xì)胞利用 CD47 的“不要吃我”的功能，在表面表達(dá)的CD47 水平高于非惡性細(xì)胞；大量研究表明，CD47 在不同類型的腫瘤中過(guò)度表達(dá)。CD47高表達(dá)水平與癌癥惡化的治療反應(yīng)和預(yù)后相關(guān)。CD47 的表達(dá)被巨噬細(xì)胞用來(lái)區(qū)分“自我”或“非自我”。CD47及其配體不僅調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，還介導(dǎo)各種病理生理過(guò)程，如中性粒細(xì)胞趨化和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，并在免疫耐受和T細(xì)胞活化中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。

靶向CD47的BsAbs

目前有四種靶向CD47的bsAbs用于治療各種癌癥患者，目前正在臨床上進(jìn)行評(píng)估。

IBI322

IBI322是信達(dá)生物研發(fā)的第一個(gè)同時(shí)抑制PD－1／PD－L1軸和CD47／SIRP－α軸的bsAb，用于治療晚期惡性腫瘤患者。臨床前研究表明IBI322能有效阻斷CD47／SIRP－α相互作用，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞吞噬CD47表達(dá)的腫瘤細(xì)胞。IBI322還有效阻斷PD－1與PD－L1的結(jié)合，并激活CD4＋T淋巴細(xì)胞，由于PD－L1在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，IBI322可以比抗CD47單克隆抗體更有效地選擇性結(jié)合到腫瘤細(xì)胞，從而降低與紅細(xì)胞上表達(dá)的CD47結(jié)合的可能性，從而最終降低與抗CD47抗體相關(guān)的毒性。因此，IBI322具有更強(qiáng)的抗腫瘤活性和更高的安全性。

臨床前研究結(jié)果表明，IBI322在體內(nèi)的療效、腫瘤分布和安全性均高于抗CD47單克隆抗體。與兩種單克隆抗體組合療法相比，雙特異性抗體可為患者提供成本更低的解決方案。因此，抗CD47／PD－L1 bsAb的開(kāi)發(fā)將為患者提供一種新穎、全面、有效和節(jié)省成本的選擇，IBI322有可能使更多有需要的患者受益。IBI322目前正在中國(guó)（NCT04328831）和美國(guó)（NCT04338659）進(jìn)行I期劑量遞增試驗(yàn)，目前沒(méi)有臨床數(shù)據(jù)報(bào)告。在中國(guó)，CIBI322A101是一項(xiàng)1a／1b期臨床研究，旨在評(píng)估IBI322治療晚期惡性腫瘤的療效。1b期研究將用于評(píng)估IBI322對(duì)肺癌、宮頸癌、食管癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌和肝癌的療效。

HX009

HX009是由杭州翰思生物醫(yī)藥有限公司（HanxBio）開(kāi)發(fā)的抗PD－1／CD47的 bsAb，用于治療晚期實(shí)體瘤患者，包括胃癌、結(jié)直腸癌和肝癌。它由抗PD－1 的IgG4亞型的單抗和SIRPα的胞外結(jié)構(gòu)域（ECD）組成，通過(guò)同時(shí)激活先天性和獲得性免疫反應(yīng)來(lái)抑制腫瘤免疫逃逸并通過(guò)阻斷免疫檢查點(diǎn)釋放免疫抑制，從而實(shí)現(xiàn)協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)。

這種抗體－受體融合形式可以利用天然配體代替抗體來(lái)節(jié)省時(shí)間和成本。然而，由于受體部分的穩(wěn)定性相對(duì)較低，抗體－受體融合蛋白的穩(wěn)定性可能低于基于兩種單克隆抗體的BSAb。目前，HX009正在晚期實(shí)體瘤患者中進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)（NCT04097769）。到目前為止，還沒(méi)有關(guān)于HX009的安全性和有效性的臨床數(shù)據(jù)報(bào)告。

IMM0306

IMM0306由上海ImmuneOnco生物制藥有限公司開(kāi)發(fā)，是一種雙特異性重組抗體受體融合蛋白。它的設(shè)計(jì)是針對(duì)B細(xì)胞上的CD47和CD20，但避免與人類紅細(xì)胞結(jié)合。IMM0306通過(guò)激活巨噬細(xì)胞的吞噬能力并通過(guò)腫瘤抗原呈遞觸發(fā)抗原特異性T細(xì)胞，將成為未來(lái)癌癥免疫治療研究的新熱點(diǎn)。

體外研究表明，IMM0306結(jié)合CD47和CD20，其親和力比單個(gè)靶向分子低3－8倍。然而，它對(duì)CD47陽(yáng)性靶細(xì)胞具有更強(qiáng)的促吞噬活性，甚至具有比利妥昔單抗更強(qiáng)的ADCC活性。有趣的是，IMM0306對(duì)人類紅細(xì)胞完全沒(méi)有結(jié)合活性。用IMM0306治療植入腫瘤的SCID小鼠可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)， 8只小鼠中有5只的腫瘤細(xì)胞被清除，這比利妥昔單抗更有效。此外，體內(nèi)研究表明IMM0306不與人紅細(xì)胞結(jié)合，也不誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡。在低劑量（1．5mg／kg）下就可清除淋巴瘤，在安全性和臨床開(kāi)發(fā)方面顯示出明顯優(yōu)勢(shì)。對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的臨床前研究表明，不同劑量的單次和多次給藥后，具有良好的藥代動(dòng)力學(xué)特征，沒(méi)有明顯的血液毒性。

IMM0306目前正在進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)（NCT04746131），以評(píng)估在B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者中的安全性和療效。同時(shí)，在中國(guó)進(jìn)行的IMM03061期劑量遞增試驗(yàn)（IND No．CTR20192612）正在難治性或復(fù)發(fā)性CD20陽(yáng)性B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者中進(jìn)行評(píng)估。到目前為止，還沒(méi)有關(guān)于IMM0306的臨床數(shù)據(jù)報(bào)告。

TG－1801

TG－1801是抗CD47／CD19的 bsAb，該bsAb通過(guò)低親和力CD47靶向抗體和高親和力抗CD19抗體的組合，以確保bsAb僅在共表達(dá)兩種抗原的腫瘤細(xì)胞上阻斷CD47。它具有增強(qiáng)的Fc介導(dǎo)的吞噬作用。TG－1801設(shè)計(jì)用于選擇性靶向CD19＋B細(xì)胞上的CD47，而保留紅細(xì)胞和血小板。它可以避免靶外毒性，代表一種新的免疫治療策略，有可能與目前正在研發(fā)的藥物產(chǎn)生協(xié)同或互補(bǔ)作用。此外，CD47和CD19的聯(lián)合靶向增強(qiáng)了預(yù)期的安全性，并通過(guò)保留其IgG1 Fc區(qū)的ADCC作用，從而提供了抗腫瘤活性的第二種機(jī)制。

因此，TG－1801可能在改善B細(xì)胞惡性腫瘤患者的預(yù)后方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。同時(shí)，TG治療首次證明TG－1801與ublituximab（抗CD20單克隆抗體）和umbralisib（PI3K－δ／酪蛋白激酶－1?抑制劑）具有協(xié)同作用，協(xié)同腫瘤生長(zhǎng)抑制似乎是通過(guò)免疫效應(yīng)細(xì)胞浸潤(rùn)增加介導(dǎo)的。目前，TG－1801正在進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)（NCT03804996），以評(píng)估其治療B細(xì)胞淋巴瘤患者的安全性和有效性。到目前為止，還沒(méi)有關(guān)于TG－1801的臨床數(shù)據(jù)報(bào)道。

SL－172154

由Shattuck Labs Inc．開(kāi)發(fā)的SL－172154是一種新型融合蛋白，由人SIRPα和CD40L（SIRPα－Fc－CD40L）通過(guò)人Fc連接而成。它的目的是阻斷CD47免疫檢查點(diǎn)，同時(shí)通過(guò)檢查點(diǎn)阻斷和TNF激活雙重機(jī)制激活CD40通路。已有的研究發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)或聯(lián)合使用針對(duì)CD40和CD47的單抗相比，SL－172154顯著改善了原發(fā)性和繼發(fā)性腫瘤的清除，類似于PD－1－Fc－OX40L。值得注意的是，SL－172154刺激食蟹猴多種血清細(xì)胞因子的劑量依賴性升高和CD40＋B細(xì)胞著邊，而不引起溶血或血小板減少。

目前，SL－172154正在卵巢癌患者的1期試驗(yàn)（NCT04406623）中進(jìn)行評(píng)估。到目前為止，還沒(méi)有關(guān)于SL－172154的臨床數(shù)據(jù)報(bào)告。

CD47靶向BsAbs的安全性和未來(lái)方向

由于CD47的廣泛表達(dá)，抗CD47抗體作為抗癌藥物的潛在問(wèn)題可能會(huì)產(chǎn)生脫靶效應(yīng)，如貧血。CD47是紅細(xì)胞更新的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，因此，有人擔(dān)心CD47靶向抗體會(huì)加速紅細(xì)胞清除并導(dǎo)致溶血性貧血。對(duì)于臨床前研究中以CD47為靶向的bsAbs，人們正在使用各種方法試圖減輕這種靶向細(xì)胞毒性。例如，NHP研究表明，第二個(gè)劑量的IBI322會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞和紅細(xì)胞壓積指數(shù)的額外下降。雖然兩組的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在第11天開(kāi)始恢復(fù)，但與第15天的Hu5F9組相比，IBI322治療組的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增加。有理由期望IBI322能夠減少患者CD47靶向介導(dǎo)的副作用。

值得注意的是，CD47靶向制劑（即Hu5F9－G4和TTI－621）可導(dǎo)致人的急性貧血和血小板減少，這也可能取決于Fc的形式。鑒于抗CD47抗體和SIRPα－Fc融合蛋白會(huì)引起這種毒性，而高親和力SIRPα單體不會(huì)引起這種毒性，因此抗CD47抗體的毒性似乎是Fc依賴性的。進(jìn)一步的研究應(yīng)考慮優(yōu)化抗CD47 bsAbs的結(jié)構(gòu)，以避免毒性。

此外，正常組織上CD47的表達(dá)可能會(huì)阻止抗CD47治療性抗體在體內(nèi)到達(dá)腫瘤細(xì)胞靶點(diǎn)，這也給抗CD47的BSAb帶來(lái)了問(wèn)題。一種規(guī)避此問(wèn)題的策略是降低bsAbs對(duì)CD47的親和力，但保留阻斷CD47－SIRPα相互作用的能力，并提高對(duì)第二種腫瘤抗原的親和力。在未來(lái)的研究中，應(yīng)該考慮更多針對(duì)腫瘤細(xì)胞的CD47及其配體的策略。

當(dāng)巨噬細(xì)胞或樹(shù)突狀細(xì)胞通過(guò)CD47阻斷對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行吞噬時(shí)，這些吞噬細(xì)胞可能將腫瘤抗原呈遞給T細(xì)胞以誘導(dǎo)抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)。因此，與T細(xì)胞檢查點(diǎn)抑制劑結(jié)合的方案可能進(jìn)一步增強(qiáng)T細(xì)胞反應(yīng)并提高療效。

小結(jié)

總之，在抗CD47 bsAbs開(kāi)發(fā)過(guò)程中必須設(shè)置兩個(gè)排除條件：1）紅細(xì)胞結(jié)合和紅細(xì)胞凝集誘導(dǎo)；2） 誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞凋亡。如果不排除上述因素，就很難取得臨床成功。目前，以CD47為靶點(diǎn)的臨床試驗(yàn)大多處于I期臨床試驗(yàn)階段，主要針對(duì)血液腫瘤，其在實(shí)體瘤中的價(jià)值尚待驗(yàn)證。期待更廣泛和創(chuàng)新地設(shè)計(jì)用于CD47 bsAbs的免疫治療，從而促進(jìn)其有效性，并減少與免疫相關(guān)的不良反應(yīng)，為更多的患者帶來(lái)福音。

參考文獻(xiàn)：

1．Potential Role ofCD47－Directed Bispecific Antibodies in Cancer Immunotherapy． Front Immunol． 2021；12： 686031．