文章背景簡介  

帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，老年人多見，平均發(fā)病年齡為60歲左右，40歲以下起病的青年帕金森病較少見。我國65歲以上人群PD的患病率大約是1．7％。大部分帕金森病患者為散發(fā)病例，僅有不到10％的患者有家族史。

帕金森病是一種運(yùn)動障礙癥，其臨床表現(xiàn)主要包括靜止性震顫、運(yùn)動遲緩、肌強(qiáng)直和姿勢步態(tài)障礙，同時(shí)患者可伴有抑郁、便秘和睡眠障礙等非運(yùn)動癥狀。帕金森病由黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元變性引起，主要病變?yōu)榧y狀體多巴胺逐漸缺失，路易小體中α－突觸核蛋白積聚。帕金森患者除運(yùn)動功能障礙之外，也會出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙。目前，運(yùn)動功能障礙仍是臨床上關(guān)注的焦點(diǎn)，而認(rèn)知功能缺陷往往被忽視。因此，迫切需要探索帕金森病認(rèn)知障礙背后的機(jī)制以及新的治療策略。

小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥與PD的發(fā)病機(jī)制有關(guān)�；罨�的小膠質(zhì)細(xì)胞釋放細(xì)胞毒性因子會損傷黑質(zhì)致密部的神經(jīng)元，從而導(dǎo)致患者運(yùn)動功能障礙。

NADPH氧化酶是在小膠質(zhì)細(xì)胞中高度表達(dá)的產(chǎn)超氧化物的酶。NADPH氧化酶激活后會產(chǎn)生胞內(nèi)和胞外活性氧，在介導(dǎo)慢性神經(jīng)炎癥反應(yīng)及相關(guān)神經(jīng)損傷中發(fā)揮著重要作用。PD患者腦內(nèi)NADPH氧化酶的表達(dá)和激活均顯著上調(diào)。此外，在多種PD模型中，NADPH氧化酶被藥物抑制或敲除可減輕神經(jīng)元小膠質(zhì)細(xì)胞的活化和變性。然而，NADPH氧化酶是否參與非運(yùn)動癥狀，尤其是認(rèn)知功能障礙仍有待研究。

大連醫(yī)科大學(xué)Liyan Hou等人于2019年在《Redox Biology》雜志上（IF 7．126，生物2區(qū)）發(fā)表了題為“Inhibition of NADPH oxidase by apocynin prevents learning andmemory deficits in a mouse Parkinson＇s disease model”的文章，文章對百草枯和代森猛（以下簡稱P＋M）誘導(dǎo)的小鼠PD模型中，NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素對學(xué)習(xí)和記憶缺陷的影響展開了系列研究。

所用到的主要方法

（1）MWM實(shí)驗(yàn)（莫里斯水迷宮實(shí)驗(yàn)）：MWM實(shí)驗(yàn)通常由一個(gè)水池、一個(gè)隱藏在水面下的平臺和一套攝像及數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)構(gòu)成。包括航行定位實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)兩部分，用于研究小鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力。航行定位實(shí)驗(yàn)：將小鼠放入水池中，記錄小鼠找到水下平臺的潛伏時(shí)間以探索小鼠學(xué)習(xí)的能力。空間探索實(shí)驗(yàn)：將水池中隱藏的平臺撤去，考察小鼠到達(dá)原平臺的軌跡及次數(shù)以探索小鼠的記憶能力。

（2）免疫組化

（3）神經(jīng)退行性變的自動計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)

（4）超氧化物檢測

（5）超氧化物及超氧化物衍生物的可視化檢測

（6）膜的提取

（7）丙二醛檢測

（8）脂質(zhì)過氧化物檢測

（9）線粒體復(fù)合物I的檢測

（10）蛋白質(zhì)印跡分析

（11）Real－time PCR

（12）免疫熒光

（13）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

文章主要內(nèi)容摘要

NADPH氧化酶的激活會導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)元退行性變及運(yùn)動功能障礙型帕金森病（PD）。但是NADPH氧化酶是否會引起PD患者的非運(yùn)動癥狀，尤其是認(rèn)知功能障礙尚不清楚。本文旨在研究NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素，對百草枯（P）和代森錳（M）誘導(dǎo)的小鼠PD模型學(xué)習(xí)記憶障礙的抑制作用。結(jié)果表明，用P＋M誘導(dǎo)的小鼠會出現(xiàn)空間學(xué)習(xí)和記憶上的損傷，這與海馬中酪氨酸氫化酶表達(dá)降低、神經(jīng)元退行性變、神經(jīng)突觸減少、α－突觸核蛋白表達(dá)及Ser129磷酸化增加有關(guān)。有趣的是，夾竹桃麻素療法可以顯著改善PD小鼠模型的學(xué)習(xí)和記憶能力，減弱海馬中細(xì)胞神經(jīng)元退行性變和α－突觸核蛋白的病變。本文發(fā)現(xiàn)夾竹桃麻素抑制了百草枯（P）和代森錳（M）誘導(dǎo)的NADPH氧化酶激活及相關(guān)的氧化應(yīng)激反應(yīng)。與百草枯（P）和代森錳（M）單獨(dú)處理相比，添加夾竹桃麻素降低了小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活化和M1極化。夾竹桃麻素抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子STAT1以及核轉(zhuǎn)錄因子NF－κB途徑的活化，這兩個(gè)因子是小膠質(zhì)細(xì)胞M1極化過程中引起炎癥反應(yīng)的兩個(gè)關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。綜上所述，NADPH氧化酶會介導(dǎo)帕金森病癥中的學(xué)習(xí)和記憶能力缺陷，而夾竹桃麻素可以通過抑制氧化應(yīng)激和神經(jīng)炎癥來阻斷學(xué)習(xí)和記憶功能的損傷。該研究揭示了認(rèn)知功能障礙發(fā)病的新機(jī)制，并為治療PD相關(guān)癡呆疾病提供了一個(gè)良好的治療策略。