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文章背景簡介

BACKGROUND INTRODUCTION

阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease，AD）是一種進行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。臨床上以記憶障礙、失語、失用、失認、視空間技能損害、執(zhí)行功能障礙以及人格和行為改變等全面性癡呆表現(xiàn)為特征。已有研究表明，AD主要病理特征是老年斑（由β－淀粉樣蛋白累積造成）、神經(jīng)元纖維纏結(jié)（由Tau蛋白過度磷酸化造成）、神經(jīng)元變性丟失。2018年全球有近5000萬AD患者，平均每3秒增加一個病例，預(yù)計到2050年將增加至1．52億人。

目前被FDA批準(zhǔn)的藥物有乙酰膽堿酯酶抑制劑（他克林、利斯的明、加蘭他敏、石杉堿甲和多奈哌齊）和NMDA受體拮抗劑（美金剛），但這些藥物沒有明顯延遲或阻止疾病的進展。AD是與遺傳、高齡、免疫功能異常、感染、內(nèi)分泌、能量代謝障礙、環(huán)境等相關(guān)的一種多病因疾病，因此AD領(lǐng)域藥物研發(fā)的難度很大。據(jù)統(tǒng)計，對于所有進入臨床的藥物，最終有12％會被FDA批準(zhǔn)。菌群－腸－腦軸參與阿爾茲海默癥等神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的研究正在成為業(yè)界高度關(guān)注的熱點話題，有研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群可產(chǎn)生脂多糖、短鏈脂肪酸、次級膽汁酸等代謝產(chǎn)物，調(diào)節(jié)免疫信號，影響神經(jīng)炎癥來干預(yù)阿爾茨海默癥的發(fā)展。小膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的免疫細胞，受外界刺激后可引起神經(jīng)炎癥，干預(yù)腸道菌群會影響小膠質(zhì)細胞的成熟與功能，可有效抑制神經(jīng)炎癥，腸道菌群與宿主免疫系統(tǒng)之間存在動態(tài)相互作用，腸道菌群失調(diào)可危害宿主免疫反應(yīng)并促進其發(fā)展。綜上，由菌群、小膠質(zhì)細胞組成的菌群－神經(jīng)免疫通路，可能是腦腸軸互作的重要環(huán)節(jié)，相關(guān)機制值得進一步研究。

甘露寡糖二酸（GV－971）是從海藻中提取的海洋寡糖類分子，是在褐藻寡糖的基礎(chǔ)上經(jīng)過進一步化學(xué)修飾得到。甘露寡糖二酸是由中國海洋大學(xué)和中國科學(xué)院上海藥物研究所共同研發(fā)，后來授權(quán)給上海綠谷制藥有限公司，不同于傳統(tǒng)靶向抗體藥物，GV－971已被發(fā)現(xiàn)能夠多位點、多片段、多狀態(tài)地捕獲β淀粉樣蛋白（Aβ），抑制Aβ纖絲形成，使已形成的纖絲解聚為無毒單體。甘露寡糖二酸還通過調(diào)節(jié)腸道菌群失衡、重塑機體免疫穩(wěn)態(tài)，進而降低腦內(nèi)神經(jīng)炎癥，阻止阿爾茨海默癥病程進展。

2019年，中國科學(xué)院上海藥物研究所耿美玉課題組聯(lián)合上海綠谷制藥有限公司等研究團隊在《Cell Research》雜志（IF 2018＝17．848；生物1區(qū)）發(fā)表了題為“Sodium oligomannate therapeutically remodels gut microbiota and suppresses gut bacterial amino acids－shaped neuroinflammation to inhibit Alzheimer’s disease progression”的文章。

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所用到的主要方法

METHODS

1．小鼠實驗（給藥、灌胃、腦／腹腔注射）

2．小鼠行為測試（Morris水迷宮、Y迷宮實驗、Cognition Wall實驗）

3．糞便樣品DNA提取，PCR擴增、測序、Q－PCR

4．小鼠糞便上清中誘導(dǎo)初始CD4 ＋ T細胞向TH1／TH2細胞的體外分化

5．液相色譜－質(zhì)譜（LC／MS）、超高效液相色譜－電噴霧離子化串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC－ESI－MS－MS）

6．免疫組化

7．苯丙氨酸和異亮氨酸誘導(dǎo)的體外分化、增殖

8．流式細胞實驗

9．生物信息學(xué)分析

10．臨床實驗

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文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

近年來，人們對腸道菌群的認知逐漸加深，大量的研究表明腸道菌群失調(diào)與阿爾茨海默病（AD）有著密切的關(guān)系，但腸道菌群在AD發(fā)病機制中的作用仍模糊不清。本文中，作者研究了腸道微生物群失調(diào)與AD進展中神經(jīng)炎癥之間的潛在機制聯(lián)系。

主要內(nèi)容包括以下幾點：（1）作者通過使用5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠（Tg）模型，發(fā)現(xiàn)AD進展過程中，Tg小鼠腸道菌群變化和腦內(nèi)外周免疫細胞呈浸潤狀態(tài)以及神經(jīng)炎癥相關(guān)；（2）作者通過抗生素處理Tg小鼠、同窩共飼養(yǎng)實驗從正反兩面證明腸道菌群的改變促使AD進程中的外周免疫細胞浸潤和神經(jīng)炎癥的激活；（3）作者證明其研發(fā)的寡糖類新藥GV－971可通過重塑腸道菌群改善Tg小鼠的認知功能障礙和減輕神經(jīng)炎癥；（4）作者又通過非靶向代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)GV－971可通過調(diào)節(jié)氨基酸代謝通路（苯丙氨酸）抑制神經(jīng)炎癥；（5）為進一步驗證上述小鼠模型上的研究結(jié)果，作者進行臨床試驗來比較MCI（輕度認知障礙AD患者）和對應(yīng)年齡段的健康人血液中免疫細胞、氨基酸等含量的差別，三期臨床試驗發(fā)現(xiàn)GV－971可抑制腸道菌群失調(diào)和相關(guān)苯丙氨酸／異亮氨酸積累，減輕神經(jīng)炎癥并逆轉(zhuǎn)認知障礙。綜上所述，本文揭示了腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致的神經(jīng)炎癥在AD進展中的作用，并提出了GV－971通過重塑腸道菌群平衡進行AD治療的新策略。該研究為全世界AD治療提供了全新的研究視角，并很可能會填補AD治療領(lǐng)域內(nèi)全世界17年沒有新藥上市的空白。

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相關(guān)鏈接

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腸道菌群可控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的小膠質(zhì)細胞