卵巢癌是婦女中最致命的婦科癌癥，大約四分之三的卵巢癌患者被診斷后即為晚期，因?yàn)樗��?jīng)常影響腹腔，缺乏典型癥狀。盡管針對卵巢癌做出了很多努力，但在過去幾十年中，總體生存率沒有提高，因此，迫切需要新的療法。

卵巢癌的一個潛在靶點(diǎn)是人表皮生長因子受體－2（HER2），它是表皮生長因子受體（EGFR）跨膜受體酪氨酸激酶家族的成員。在上皮性卵巢癌中，HER2表達(dá)更常見于老年患者、漿液性亞型以及晚期和高分化患者。

目前臨床上使用了兩種HER2靶向抗體：trastuzumab和pertuzumab。這些抗體在乳腺癌治療中都取得了成功，然而，它們在HER2＋卵巢癌中的作用一直存在爭議，一些研究顯示它們只有微弱的反應(yīng)。

隨著免疫細(xì)胞導(dǎo)向療法的進(jìn)展，如雙特異性T細(xì)胞接合器（BiTE）、三特異性殺傷接合器（TriKEs），癌癥免疫治療取得了顯著突破。這里介紹一種新型的HER2靶向TriKEs，通過將抗CD16的單域抗體（VHH）和識別HER2的scFv與IL－15串聯(lián)而成。動物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，它在體外有效地增強(qiáng)了NK細(xì)胞介導(dǎo)的對表達(dá)HER2的卵巢癌的控制，并在小鼠異種移植模型中成功地抑制了腫瘤生長，這些數(shù)據(jù)支持將HER2靶向TriKE進(jìn)一步用于卵巢癌患者的臨床實(shí)驗(yàn)。

CAM1615HER2 TriKE

TriKEs由三個獨(dú)立的結(jié)合區(qū)域組成，包括結(jié)合CD16的單域抗體、結(jié)合癌細(xì)胞上HER2抗原的單鏈抗體和介導(dǎo)NK細(xì)胞上細(xì)胞因子信號的野生型人IL－15。CAM1615HER2 TriKE采用原核表達(dá)。

CAM1615HER2 TriKE介導(dǎo)的增殖

TriKE中的IL－15部分旨在特異性介導(dǎo)NK細(xì)胞上的IL－15信號。與未給藥對照組或rhIL－15給藥組相比，CAM1615HER2 TriKE增強(qiáng)了整體NK細(xì)胞的增殖，促進(jìn)了NK細(xì)胞在三輪分裂后的增殖，并在試驗(yàn)結(jié)束時產(chǎn)生了最高數(shù)量的NK細(xì)胞。

相反，當(dāng)評估T細(xì)胞時，與rhIL－15不同，CAM1615HER2 TriKE不會擴(kuò)增T細(xì)胞。

CAM1615HER2 TriKE的功能測定

為了測定針對HER2表達(dá)細(xì)胞的TriKE特異性活性，將PBMC、HER2＋腫瘤細(xì)胞和CAM1615HER2TriKE一起孵育，通過評估NK細(xì)胞脫顆粒（CD107a）和炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生（IFN－γ）來測定NK細(xì)胞活性。

當(dāng)與CAM1615HER2 TriKE一起孵育時，與對照組相比，NK細(xì)胞對HER2陽性SKOV－3、OVCAR3和OVCAR5細(xì)胞產(chǎn)生的CD107a和IFN－γ明顯增多。

CAM1615HER2 TriKE還顯示了對廣泛的HER2表達(dá)腫瘤的活性，包括胰腺癌（BxPC－3）、前列腺癌（C4－2）、肺癌（NCI－H322）和乳腺癌（MCF－7L）。

這些數(shù)據(jù)證明了CAM1615HER2 TriKE對多種HER2表達(dá)腫瘤的廣泛適用性。

CAM1615HER2 TriKE的體外殺傷能力

為了確定CAM1615HER2 TriKE擴(kuò)增NK細(xì)胞介導(dǎo)的卵巢腫瘤殺傷的能力，采用自動成像平臺可通過對卵巢癌細(xì)胞球體大小和強(qiáng)度的定量測量，在較長時間內(nèi)動態(tài)評估殺傷效果。

結(jié)果顯示，CAM1615HER2 TriKE在48小時內(nèi)通過將球體顏色從綠色（活的SKOV3細(xì)胞）變?yōu)楹谏�（死的SKOV3細(xì)胞）來誘導(dǎo)腫瘤的動態(tài)和強(qiáng)勁的殺傷，而IL－15組在三天內(nèi)誘導(dǎo)的殺傷較少，但比未治療組和CAM16對照組更多。這些數(shù)據(jù)顯示了CAM1615HER2 TriKE殺傷多細(xì)胞腫瘤的效力。

CAM1615HER2 TriKE的體內(nèi)藥效

在含有人類NK細(xì)胞和SKOV3細(xì)胞的異種小鼠模型中測定CAM1615HER2 TriKE的體內(nèi)功效。使用生物發(fā)光成像（BLI）對第40天左右的腫瘤負(fù)荷進(jìn)行評估，結(jié)果顯示接受CAM1615HER2 TriKE的小鼠與僅接受NK細(xì)胞或NK細(xì)胞加上對照TriKE的小鼠之間存在明顯差異。

實(shí)驗(yàn)過程中的BLI跟蹤顯示，三組之間的腫瘤負(fù)荷在第30天左右開始分離，在第47天左右出現(xiàn)最大差異，CAM1615HER2 TriKE顯示出高度顯著和優(yōu)越的腫瘤控制。值得注意的是，盡管對照TriKE能夠誘導(dǎo)NK細(xì)胞擴(kuò)增，但與CAM1615HER2 TriKE相比，它顯示出腫瘤控制能力降低。BLI結(jié)束后的存活追蹤顯示，未治療組的6只動物中有5只在第52天死亡，而CAM1615HER2TriKE治療組在第72天仍有50％的存活率。這些數(shù)據(jù)證實(shí)CAM1615HER2TriKE在異種模型中有效抑制人類卵巢癌的生長，并且體內(nèi)療效具有高度特異性。

小結(jié)

在卵巢癌中，HER2表達(dá)水平存在爭議，HER2的表達(dá)可能因亞型而異。盡管如此，HER2表達(dá)與卵巢癌預(yù)后不良之間的關(guān)系已得到公認(rèn)。

然而，在卵巢癌中使用HER2靶向單抗的臨床效果遠(yuǎn)不如人意。CAM1615HER2 TriKE通過靶向CD16和HER2并串聯(lián)IL－15，將HER2靶向的ADCC與NK特異性增殖信號相結(jié)合，從而大大增強(qiáng)卵巢癌患者內(nèi)源性NK細(xì)胞的活性。

臨床前數(shù)據(jù)顯示，CAM1615HER2可誘導(dǎo)抗HER2表達(dá)腫瘤的活性，通過CD16激活NK細(xì)胞，從而特異性殺死卵巢癌細(xì)胞，驅(qū)動特異性NK細(xì)胞擴(kuò)增，并誘導(dǎo)體內(nèi)卵巢腫瘤的控制。

與T細(xì)胞相比，NK細(xì)胞經(jīng)過特殊進(jìn)化，通過NK細(xì)胞上的抑制性受體與正常細(xì)胞上的同源HLA相互作用，避免殺死正常細(xì)胞，為NK細(xì)胞靶向方法增加了額外的安全性。因此，CAM1615HER2 TriKE具有獨(dú)特的特性，可能改善目前臨床上的HER2靶向抗體。

參考文獻(xiàn)：

1．A HER2 Tri－Specific NK CellEngager Mediates Efficient Targeting of Human Ovarian Cancer． Cancers （Basel）． 2021Aug； 13（16）： 3994．